化学(灭菌)指示指标和生物指示指标

消毒过程中，应采用机械、化学(消毒)和生物指标相结合的方法，定期对消毒条件进行评价，间接地对加工物品的微生物状况进行评价。蒸气杀菌机械监测装置包括通过检查温度记录表(或电脑打印输出)，每日评估循环时间和温度，并通过压力表评估压力。在电子交易中使用的机械监视器包括时间、温度和压力记录器，它可以通过电脑打印输出提供数据，仪表和/或显示。一般而言，电子烟灭菌的两个基本要素(即气体浓度和湿度)不能在卫生保健中监测到灭菌器。

与生物指示剂相比，化学指示剂(灭菌)指示剂更方便和便宜，而且在灭菌的边缘灭菌时间(例如2分钟)不准确的可能性更大。在使用时，应将化学(灭菌)指示指标与生物指示剂结合使用，但不应取代化学(灭菌)指示指标，因为它可以表明灭菌是在边际灭菌时间进行的，并且只有含有抗性孢子的生物指示剂才能测量微生物对灭菌的能力。

每只包装的外部都贴有化学(灭菌)指示标志，表示包装已经过灭菌周期，但这并不表明灭菌已完成。每个包装内也应放置化学(杀菌)指示剂，以验证杀菌剂是否渗入。化学性(杀菌)指标通常为热敏性或化学敏性油墨，指一种或多种杀菌参数(如蒸气时间、温度和/或饱和蒸气)改变颜色的情况；起始时间、温度、相对湿度和/或 ETO浓度。监控一种或多种基于化学(灭菌)指标的杀菌参数的能力。当内部和/或外部指标表明没有正确处理时，不应使用该项。除气试验必须每天在空动力除气杀菌器(如真空蒸汽杀菌器)中进行(B-D试验)。

许多权威机构认为，生物指示器是离灭菌过程最近的理想监视器，因为它们可以通过使用具抗药性的微生物(即细菌)，而不仅仅是测试灭菌所需的物理和化学条件来直接测量灭菌过程。因为与病人护理设备上常见的微生物污染物相比，用于生物指标的芽孢杆菌具有更强的抗药性，而且数量也更多，所以展示生物指示剂灭活的结果强烈地表明，负载中的其他潜在病原体已经被杀死。

消毒过程的理想生物监测应该易于使用，成本低廉，不受外源污染，在最短的周期内提供结果，以便在消毒参数(例如steam-time，温度和/或饱和蒸气；时间，温度，相对湿度和/或 ETO浓度)不足的情况下尽早完成纠正措施。

生物学指标是的工艺指标，直接监测杀菌过程的致命性。用来监控杀菌过程的孢子已经显示出对杀菌剂的耐药性，而且比在医疗设备上发现的生物包菌更具耐药性。用阿托品孢子(106)监测 ETO和干热；用硬脂嗜热孢子(105)监测蒸汽灭菌、离子体灭菌，如过氧化物气体和液体过氧乙酸灭菌器。硬脂嗜热菌在55-60℃孵化，而阿托品在35-37℃孵化。蒸气和低温杀菌器(如过氧化氢等离子体，过氧乙酸)应该至少每周监测一次，并且要准备好合适的孢子。如经常使用消毒器，每日使用生物指示剂可提前发现设备故障或程序错误，从而在生物指示剂呈阳性的情况下，尽量减少对患者的监测和产品召回。当每一个负载包含一个可植入的对象时，应该进行监控。在孢子试验结果为阴性之前，如果可行的话，就不应该使用可植入物。

起初，孢子的生物指示剂在培养过程中最多需要7天(也就是，当时孢子很少存活)。这种新一代生物指示剂被装在塑料瓶里，里面有一根孢子粉和一种可碎玻璃安瓿的生长介质。虽然在24小时内检测出有明显故障，但其潜伏期最长为48小时。用非荧光底物酶解产生的荧光产物快速读出生物指示剂检测嗜硬脂酸杆菌酶的存在已在市场上使用10多年，研究表明，蒸气灭菌对rapid-readout的敏感性试验(132° C重力灭菌1小时，121° C重力灭菌3小时，132° C真空灭菌器)与传统sterilization-specific生物指示剂和荧光快速读出结果相类似，能准确预测24-48小时和7天。生物指示剂是一种双重指示系统，因为它也能探测硬脂嗜热孢子生长过程中产生的酸性代谢产物。这与由细菌来源的无孢子酶系所构成的指标体系不同。利用次优灭菌周期(例如降低时间或温度)和基于酶的指标系统的独立比较数据还没有公布。

为了对电子烟灭菌过程进行快速、可靠的监测，设计了一种新型的电子烟生物指示剂。FDA已经批准该指标在美国使用。生物指示剂快速读出检测阿托品 B.的存在，通过检测荧光信号显示阿托品 B.体内存在β-糖苷酶活性。本指标也可用于阿托品孢子生长过程中酸性代谢产物的检测。据生产厂家称，只要有活孢子存在，就能检测到这种酶。可以使用快速读取式电子烟生物指示剂99%监测电子烟和ETO-hcfc混合杀菌循环，专门为监测闪光杀菌而设计的生物指示剂现在已经出现。

因为杀菌失败的可能性很大(蒸汽杀菌约占1%)，疾病控制和预防中心及手术期注册护士协会(AORN)已经提供了一种程序，在使用蒸汽杀菌的芽孢试验结果呈阳性时，可予以采用。1981年的美国疾病控制和预防中心的建议是：“除非蒸汽灭菌器或灭菌程序有缺陷，否则，除可植入物外，不需要因一次孢子检测呈阳性而对其它物品进行召回。”该建议的理由是，灭菌器中的单个阳性孢子检测偶尔会发生。其原因可能是芽孢抵抗力轻微改变，灭菌器使用不当，以及在培养过程中受到实验室污染(不常进行独立孢子试验)。如机器(例如，蒸汽灭菌器的时间、温度、压力)和化学指标(内部和/或外部)显示灭菌器工作正常，单一阳性孢子试验不一定表明灭菌器有问题，但孢子试验应立即重复。若孢子检测仍呈阳性，应停止使用消毒器，直至消毒剂完全消失。AORN还指出，单次孢子检测阳性并不一定意味着杀菌器失效。如出现阳性反应，应立即重新消毒杀菌，使之能正常使用和使用。除非发现灭菌器有问题，否则不会召回除植入式产品以外的产品。如灭菌器出现故障，应视其为非无菌物品，并应尽可能收回可疑装载物品，重新处理。

当病人护理项目在检查之前被使用时，感染控制专家应该与中心处理，手术服务和风险管理人员一起来评估感染风险。需要考虑的因素包括：化学(杀菌)指标的结果(例如，非反应性化学指标可能表明未达到温度)；其他生物指标(星期二为阳性，星期三为阴性)；灭菌器中与阳性生物指标相关的参数(如在适当的温度下缩短时间)；时间-温度图(或打印输出)；以及与去污手术器械有关的微生物负荷(例如，85%的去污手术器械 CFU低于100)。蒸气杀菌的安全性非常高，与展示孢子生长的货物相关的感染风险非常低，尤其是这些货物经过适当清洗并达到了温度(见可接受的化学指标或温度图)

检测不正确或指标不正确可能导致假阳性生物指示剂。不恰当的储存、加工、产品污染、材料的破坏或孢子抵抗力的改变都会导致霉变。在亚种培养中，革兰氏染色和阳性生物指标可判断污染物是否产生假阳性。但是，在某一事件中，作为生长培养基的肉汤中含有一种污染物 B.凝血剂，导致55摄氏度的肉汤变得混浊，通过检测不同生产厂家的成对生物指数可以帮助评估产品的缺陷。在采用单独的生物指标时，由外部污染引起的假阳性生物指标并不常见。

生物学指标测试包的大小和组成应该标准化，已经对空气的去除和杀菌剂的渗透性提出了重大挑战， AAMI建议使用16个标准毛巾包进行蒸汽消毒，即813,819,987。每块毛巾将被纵向折叠三分之一，然后在中间横向折叠。在包装的几何中心，将一个或多个生物指标放在8至9条毛巾之间。将毛巾叠放在另一块上，形成一块(约6英寸高)，重量约3磅，密度约为11.3磅/立方英尺。这种模拟蒸汽消毒器实际使用的标准箱，目前尚未被广泛采用。已被证实相当于 AAMI 16毛巾测试包的市场上可使用的一次性测试包也可使用。试验包应平放于另一个装满消毒器的消毒室中，并放置在最不利于消毒的地方。这个区域通常位于消毒器的前端，底部，靠近排水管道。试验用批次的对照生物指标不应暴露在灭菌剂中，而应先孵化，以验证试验用孢子在灭菌前是否有活力，并进行适当的孵化。最为保守的方法是在每次运行时使用一个控件；但是，较少的用法可能就足够了(例如每周)。另外，还有一种常规的电子放疗试验包，将生物指示剂放入带柱塞的塑料注射器中，然后放入干净的手术毛巾的折叠处，再进行包扎。此外，还可以使用已证明相当于 AAMI测试包的商业处理测试包。检测包放在杀菌器负载的中心。消毒记录(机械、化学和生物)应保持一定的时间，以符合标准和州和联邦法规。

在欧洲，生物监护仪不常用来监控消毒过程。灭菌器项目的释放则基于监测灭菌过程的物理条件，即所谓的“参数释放”。"参数化放行要求灭菌设施具有明确的质量体系，并确认灭菌物品的灭菌过程。现在欧洲可以接受蒸汽、干热和电离辐射过程中的参数释放，因为物理条件是可以理解的，并且可以直接监控。举例来说，使用蒸汽消毒器，可以用探测器来监测负荷，探测器会产生有关温度、时间和室内典型位置的湿度数据，并与在验证过程中制定的标准进行比较。

经常前往使用消毒器的地区进行感染控制查房，以便将消毒器的使用标准化，从而可以发现操作者的能力是否有问题；灭菌记录文件，包括化学(灭菌)和生物指标检测结果；消毒设备的维护和包装；以及包装的装入编号。审查还可以识别改进活动，以确保操作者遵守既定标准。