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首先，将需要灭菌的医疗器械或物品清洁单调后放入灭菌袋内。
有些医疗器械含有尖利的零件，运用医用灭菌袋进行灭菌时应留意摆放方向与剥离方向相反，以确保运用安全。
第二步，揭去开口舌上的医用自粘胶带关闭袋口（自封型灭菌袋）。
第三步，揭掉切线处的离型纸，沿切线封好袋口，标明灭菌时间、内容、用途等相关信息。
第四步，将灭菌袋以及期内的医疗器械置于压力STEAM蒸汽灭菌设备或EO环氧乙烷灭菌设备内,按惯例方法进行灭菌。供认灭菌进程指示标识已变色
第五步，将已灭菌的灭菌袋取出贮存于温度低于25C、湿度低于60%的洁清区域处待用。
第六步，需运用时，扯开灭菌袋，取出其内医疗器械和物品，即可运用。此时器械物品为无菌的。
